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雙酚A檢測(cè)液相色譜法

更新時(shí)間:2016-05-20      點(diǎn)擊次數(shù):4498

  雙酚A,也稱BPA,是一種廣泛應(yīng)用于塑料制造的化學(xué)物質(zhì),主要用于生產(chǎn)聚碳酸酯(PC)、環(huán)氧樹脂等多種高分子材料,被廣泛用于生產(chǎn)化工產(chǎn)品和食品相關(guān)產(chǎn)品,如嬰兒奶瓶、餐具、微波爐器皿、食品包裝容器的涂層、飲料瓶以及供水管道等。研究顯示,雙酚A是一類具有雌激素樣活性的內(nèi)分泌干擾物,可能誘發(fā)兒童性早熟或致癌。

  自2011年3月1日起,歐盟成員國(guó)禁止使用含雙酚A的塑料生產(chǎn)嬰兒奶瓶,并從6月1日起禁止進(jìn)口此類塑料嬰兒奶瓶。針對(duì)雙酚A安全性問題,現(xiàn)已將雙酚A檢測(cè)液相色譜法普遍應(yīng)用。

雙酚A檢測(cè)液相色譜法實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:

試劑:甲醇:色譜純

   乙酸、無水乙醇:分析純

   水:超純水(符合實(shí)驗(yàn)室一級(jí)用水)

   雙酚A標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):純度>99.0%

儀器:LC-10Tvp液相色譜儀

   SPD-10Tvp紫外檢測(cè)器

   手動(dòng)進(jìn)樣閥

   電子天平

   超聲波清洗器

   超純水機(jī)

   恒溫水浴鍋

 

雙酚A檢測(cè)液相色譜法分析條件:

 色譜柱:C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)

 流動(dòng)相:甲醇+水=75+25

 流速:0.7mL/min

 柱溫:30℃

 檢測(cè)波長(zhǎng):224nm

  進(jìn)樣量:20μl


 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

  雙酚A標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱取適量的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),用甲醇稀釋,配置成濃度為1000μg/ml的雙酚A儲(chǔ)備液。

  雙酚A標(biāo)準(zhǔn)供試液:使用時(shí)用3%乙酸溶液稀釋成濃度為1.0μg/ml的溶液. 

樣品前處理

  稱取5g的樣品,將其剪成5×5mm的小碎片,置于250ml的三角燒瓶中,加入100mL的甲醇,50℃下超聲提取2小時(shí),過濾至250mL雞心瓶,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干,用5mL水漩渦洗脫,待凈化。

樣品濃縮和凈化

E固相萃取小柱

活化、平衡:10 mL甲醇,10 mL水依次過柱;

上樣:在水到達(dá)小柱上層篩板時(shí),加入待凈化液;

淋洗:6 mL水合10 mL 30%甲醇水溶液依次淋洗小柱,流出液棄去;

洗脫:6 mL 50%乙腈水溶液洗脫,收集洗脫液。

洗脫液50℃下氮?dú)庵两桑?mL流動(dòng)相溶解,進(jìn)樣分析。

結(jié)果與討論

   由參考文獻(xiàn)可初步將流動(dòng)相定為甲醇與超純水,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知:當(dāng)只針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)試時(shí),使用純甲醇做流動(dòng)相對(duì)雙酚A的響應(yīng)效果,在檢測(cè)樣品含量時(shí),我們可發(fā)現(xiàn),以純甲醇作為流動(dòng)相將會(huì)產(chǎn)生大量的溶劑峰,影響到樣品檢測(cè)結(jié)果,因此我們適當(dāng)?shù)奶砑右欢ū壤乃档土鲃?dòng)相的洗脫能力,以避開溶劑峰的影響。由于3%的乙酸溶劑峰較大,因此將甲醇:水=75:25的流動(dòng)相作為*流動(dòng)相,其中可根據(jù)不同樣品的性質(zhì)我們也可靈活利用色譜條件。

   波長(zhǎng)的選擇: 經(jīng)過二級(jí)陣列管檢測(cè)器全波段掃描可知:雙酚A在200nm至400nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)有三個(gè)zui大吸收峰,分別為200nm、224nm、280nm,由于考慮到流動(dòng)相的影響,200nm在流動(dòng)相甲醇的截至波長(zhǎng)(210nm)內(nèi)因此不予考慮,而雙酚A在224nm處的響應(yīng)度比在280nm處的響應(yīng)度高,因此將*波長(zhǎng)選定為224nm。

陰性和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

  不加入樣品,加入試劑,按樣品處理方法進(jìn)行測(cè)定,在組分相應(yīng)保留時(shí)間處沒有吸收;適當(dāng)?shù)母纳V條件中的流速、流動(dòng)相比例、色譜柱品牌檢測(cè),均能符合相應(yīng)的參數(shù)條件;其中取標(biāo)樣10μl進(jìn)樣檢測(cè),雙酚A的理論板數(shù)大于7000。

 精密度和重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)

  取雙酚A標(biāo)準(zhǔn)供試液,進(jìn)樣6針,每次10ul,進(jìn)行測(cè)定,考察該組分精密度及重現(xiàn)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.49%,重現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.095%。

線性關(guān)系和檢測(cè)限

  在本方法確定的色譜條件下,雙酚A濃度為0.1008ug/ml-1008.2ug/ml范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,其峰面積-濃度的線性方程為:y = 10.537x+14.293,相關(guān)系數(shù)R2=0.9999;在 S/N =3的條件下,本方法zui低檢測(cè)限為0.038mg/kg。

 回收率試驗(yàn)

  采用在實(shí)際樣品中加入不同添加水平的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)溶液的方式進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn),按前處理方法處理后分析,采用外標(biāo)法定量,每個(gè)添加水平單獨(dú)測(cè)3次,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,其平均回收率為85.78%~98.12%,RSD為397%~6.63%。

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